Держится Афиосемион двухполосый в верхнем и среднем слоях воды, предпочитая освещенные места. Это миролюбивая и оживленная аквариумная рыбка, охотно собирается в стайку. Содержать такие группы рыбок лучше в видовом аквариуме, длина которого превышает 0,6 м.
В общем аквариуме афиосемионы двухполосые становятся пугливыми, постоянно прячутся в укрытиях, отказываются от корма, их окрас становится тусклым.
В аквариуме должны быть как заросли аквариумных растений, высаженных в грунт, так и растений плавающих в толще воды. Параметры воды для оптимального содержания: температура от 20 до 23°С, жесткость 1…10°, кислотность 5-6,5. слой воды от 20 см. Ежедневно в течении двух часов полезно солнечное освещение. Мощность искусственных осветителей от 0,4 до 0,5 Вт на литр. Корм: живой или заменитель.